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盎铂(ONGBR)基因编辑技术的技术原理

盎铂应用人体内正常存在的逆转录酶ORF2p以及除待插入序列外无任何非基因组序列的Framework(gRNA),整个技术完全人源,尽可能避免干扰受编辑目标的基因组及引发免疫反应,理论人体亲和性更高;
此外,ORF2p难以结合和剪切正常基因组,只能依次剪切与framework结合的基因组靶位点的单链DNA,不产生基因组双链断裂,编辑更加精准、特异和安全;
ORF2p剪切要求framework与基因组靶位点高度同源的同时靶位点上游和下游至少20bp序列完全匹配,识别精度更高。

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刻毋限®

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刻毋限®基因编辑辅助技术,应用人源逆转座子ALU元件及人源逆转录酶ORF2p,将同源重组模板连接逆转座子序列,通过于细胞内或体内转录产生的含有靶位点及待插入序列信息的特定RNA后再由ORF2p将其逆转录,不断扩增可用于基因编辑技术如CRISPR-Cas9、ZFN及TALEN等的同源重组模板,从而提升相应技术的基因编辑效率。

此外,若在体外转录(IVT)产生同源重组模板RNA,并于体外结合人源内切酶及逆转录酶ORF2p后转入目标体系,则可达到不给予DNA成分即可于目标体系中产生同源重组DNA模板的目的,使基因编辑技术去DNA化。

刻毋限®技术为完全人源,所用逆转座子及逆转录酶在正常人体胚胎内亦有高表达,安全有保障。