基于刻毋限®技术的基因编辑辅助工具

Based on Copifinite ™

 为你的基因编辑   提供无尽模板

当CRISPR-Cas9高效切开基因组时,唯有充足的同源重组模板能让人安心。

然而事与愿违,由于DNA入核效率低下,使得辅助CRISPR-Cas9基因编辑的同源重组模板在核内的含量或难以达到要求;在没有同源重组模板的情况下,断裂的基因组双链将由随机序列连接,使基因编辑的准确性和效果大打折扣,对临床治疗更是灾难,极其危险。

红云青霄自主研发的刻毋限®技术,应用人源的逆转座子及逆转录酶,即使仅有一个DNA同源重组模板进入细胞核,亦可持续产生单链及双链DNA同源重组模板*,在TALEN、ZFN或CRISPR-Cas9等各种基因编辑技术切开基因组双链后,为其提供充足的同源重组模板,使每一个基因编辑作用,都稳定、高效且精准。

此处“*”号为理论情况。

简单的设计要求:

您仅需提供

同源重组的模板序列

即可享用

由红云青霄提供的

刻毋限®技术

 

 

让基因编辑彻底抛开DNA

真正进入RNA时代

随着CRISPR-Cas9技术的不断发展,其载体从单纯的DNA逐渐演变到RNA和RNP,DNA载体对于CRISPR-Cas9技术切断基因组双链的作用已然并非必需。然而CRISPR-Cas9技术中所应用的同源重组模板却止步于DNA成分,至今仍无法用RNA或RNP替代。

红云青霄的刻毋限®技术,应用人源的逆转座子及逆转录酶,使同源重组模板得以以RNA或RNP的形式给予目标,让CRISPR-Cas9技术得以完全抛弃DNA,以及DNA对基因组所带来的不确定性,提高基因编辑准确性的同时,降低其不利作用,并让基因编辑的临床应用更安心。

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目前红云青霄提供刻毋限®技术的DNA版本、RNA版本及RNP版本 

刻毋限®作用机制

刻毋限®的技术应用Alu元件等人源逆转座子并结合人源的逆转录酶ORF2p,使由DNA载体转录产生的含有靶位点(靶位点上游序列和靶位点下游序列)及待插入序列信息的特定RNA 被不断逆转录为 DNA,为TALENZFNCRISPR-Cas9等基因编辑技术在切开基因组后提供充足的同源重组模板,从而提高基因编辑的效率。

 刻毋限®技术同样可以在体外制备RNA或于体外使RNA结合ORF2p等蛋白形成RNP后再给予目标体系发挥作用,使CRISPR-Cas技术彻底脱离DNA成分。

刻毋限®技术的DNA、RNA(包括体外转录方式)及RNP形式已申请发明专利。

 

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